智鼠课堂 | 三种实验鼠标记方法及其编号规则

导语

在动物实验研究中，个体识别是关键一环。面对不同品系、日龄和实验需求，如何选择合适的标记方法？是追求永久性，还是兼顾动物福利？本文系统梳理了三种主流实验鼠标记方法——剪趾法、耳标法与耳孔法，从侵入性、适用场景到操作细节全面解析，助你在合规、人道的前提下，高效完成实验动物管理。

一、主流的实验鼠标记方法对比

二、剪趾编号法

实验鼠剪趾法是一种用于新生啮齿类动物的永久性编号方法，但因其具有侵入性，在国际上被严格限定为“没有其他方法可用时的最后选择”。由于该方法具有疼痛和潜在影响，操作必须规范，并优先考虑动物福利。

1、主要应用与限制

（1）适用日龄：最佳日龄为出生后5-7天内。

（2）品系：新生小鼠或大鼠乳鼠，除特殊表型如先天性脚趾畸形的品系不适用外其他品系均适用。

（3）核心限制：当耳标、耳孔、皮下芯片、永久性染色等其他个体识别方法均不可行时方可使用，并需在动物使用方案中特别说明理由。

（4）实验需求：不要求小鼠脚趾完整性的实验。研究表明，剪趾可能影响动物的抓力和运动行为。因此，在涉及行为学测试（如转棒实验、跑步机）或需要评估运动功能的研究中，应避免使用此方法。

2、操作与编号体系

（1）核心操作：用锋利的眼科剪或手术刀片，在关节处剪断特定脚趾的一段趾骨（非仅趾尖），以实现永久性标记。

关键操作步骤：保定动物 → 用70%酒精消毒脚趾 → 使用消毒过的锋利器械快速剪断趾骨 → 立即用手指按压止血 → 用碘伏消毒 → 将幼鼠迅速放回母鼠身边，并在5分钟后检查是否完全止血。

（2）常见编号体系：以后脚趾表示个位（左1-5，右6-10），前脚趾表示十位（左10-50，右60-90）。遇到100号、200号等整百号的时候，对应小鼠不进行断脚趾标记。百位数不标记，即当编号超过100号时，后续的编号再次从1号开始标记。

编号示例：

8号鼠：剪断右后肢的第3个脚趾（对应编号6+2）。

34号鼠：剪断左前肢的第3个脚趾（代表十位30）和左后肢的第4个脚趾（代表个位4）。

101号小鼠：只需剪断左下脚的第一个脚趾。

201号小鼠脚趾标记与101号相同。

3、重要操作规范

（1）断趾时，应剪断其一段趾骨，不能只断趾尖，以防伤口痊愈后辨别不清。

（2）禁止剪除每只脚上超过1个脚趾，也禁止剪除最内侧的小趾（悬蹄）

（3）禁止对超过7日龄的动物进行剪趾，超龄断趾小鼠较为痛苦且出血量较大。

（4）当同窝出生需要同时标记的小鼠较多(超过100只)，应注意相差一百号的脚标相同的小鼠混淆，分笼时避免将脚标相同的小鼠分在同笼。

三、耳标编号法

实验鼠耳标标记法是实验室常用的永久性个体识别方法，主要用于对小鼠和大鼠进行长期、清晰的个体编号。其核心是通过专用工具，将带有唯一编号的标签（金属或塑料）固定在动物的耳廓上。

1、应用与限制

（1）日龄：通常建议在小鼠断奶后（约21日龄）及以后进行。此时耳廓软骨和组织已发育得足够强韧，能承受耳标并降低撕裂风险。对于长期实验，在实验开始前（如分组时）进行标记是最佳实践，让动物有足够时间恢复并适应标签。

（2）品系：某些品系（如瑞士鼠）可能更为活跃好斗，需更注意检查标签牢固度和动物间打斗情况。

（3）核心限制：绝对不适用于新生或离乳前（<21天）的幼鼠，其耳部组织过于娇嫩，操作极易导致严重损伤、出血甚至死亡。

2、编号系统

耳环上直接有数字编号，所以可以直接读取。有“纯数字”耳标（可选数字1-1000）；还有“字母+数字”耳标（可选号段A-Z字母+数字1-1000）。

3、操作流程

（1）正确保定：采用稳固的 “颈背部抓取法” ，用非利手拇指和食指捏住小鼠颈后松弛皮肤，使其头部固定，身体可倚靠在手掌或操作台面上。确保动物呼吸顺畅。

（2）关键定位（成败核心）：将耳标打在耳廓中下部，软骨丰富、血管较少的区域（见下图示意）。绝对避开耳廓边缘、耳根部及可见的粗大血管。

（3）快速施打：将消毒并装好耳标的钳头垂直对准定位点，迅速、一次性地用力握紧手柄到底，听到“咔哒”声后松开。犹豫或未打穿软骨会导致佩戴不牢。

（4）即刻检查：轻拉耳标，确认已牢固穿透并闭合。是否在预定位置，有无歪斜。通常仅有微量出血。若有活动性出血，用无菌棉签或纱布轻压止血，直到停止。

（5）后续注意事项：建议将打好耳标的动物单独放置于洁净垫料的笼内观察数小时至24小时，以防同伴舔咬伤口或打斗扯掉耳标。术后至少连续观察3天，注意动物精神状态、食欲及耳部有无红肿、异常分泌物（感染迹象）或动物频繁抓挠耳部（不适迹象）。

四、耳孔编号法

耳孔标记法是一种经济、永久的小鼠个体识别方法，通过在耳廓上打出一系列特定排列的小孔进行编码。

1、应用与限制

（1）日龄：21日龄（断奶后）及以上。此时耳廓软骨发育完全，能承受打孔操作且孔洞能永久保持。实验分组时（通常为4-6周龄）为最佳时机，幼鼠组织愈合快，应激反应小。

（2）品系：适用于所有毛色品系，包括深色品系（如C57BL/6），因为孔洞本身形成物理缺口，不受色素影响。FVB/N等敏感品系耳部较薄，需使用更小孔径（如1.0mm）的耳孔针，并密切观察愈合情况；好斗品系（如瑞士鼠）需注意同伴互咬导致耳孔变形。

（3）核心限制：绝对禁止用于新生鼠（<14日龄），耳部组织过薄易撕裂，出血风险高且孔洞会随生长闭合。编号容量有限，单耳通常最多容纳5-7个可清晰区分的孔位，理论最大编号约1-99（双耳组合），实际常用范围1-50。孔洞可能随年龄部分愈合或拉伸变形，尤其在高繁殖活力的雌鼠中。孔位精准度和一致性严重依赖操作者技术，不同人员打孔可能导致识别混淆。